Postup ICSI: fáze implementace, odlišnosti od klasického IVF

Procedura ICSI (ICSI – Intra Cytoplasmic Sperm Injection) spočívá v zavedení (intracytoplazmatické injekci) spermie do cytoplazmy vajíčka a provádí se hlavně při snížené koncentraci nebo pohyblivosti spermií. Tato metoda léčby neplodnosti souvisí s technologiemi asistované reprodukce a je jednou z fází IVF (volitelné). První úspěšná manipulace byla provedena v roce 1992. Do roka se narodily takto počaté děti. V Rusku se tato metoda používá od roku 1996. Dnes se používá po celém světě a umožňuje stát se rodiči i párům s diagnózou neplodnosti.

Indikace k oplodnění metodou ICSI

• Mužský faktor neplodnosti (s významným poklesem koncentrace spermií, motility a/nebo morfologie)
• Použití chirurgicky získaných spermií
• Použití oocytů po kryokonzervaci
• Předchozí neúspěšný pokus o standardní IVF (pokud bylo oplodněno méně než 20 % získaných zralých oocytů)
• Programy zrání oocytů in vitro

Účinnost metody

Pravděpodobnost oplodnění během ICSI může dosáhnout 100% těhotenství může nastat i při těžké mužské faktorové neplodnosti, kdy je přirozené početí nemožné. Vysoká účinnost metody je dána tím, že specialisté vybírají spermie s nejlepšími vlastnostmi.

Jak postup ICSI probíhá a jak se metoda liší od standardního IVF?

Všechny fáze IVF s intracytoplazmatickou injekcí jsou až do okamžiku oplodnění totožné se standardním postupem. Právě v této fázi začínají rozdíly. Spočívají v tom, že spermie neoplodní vajíčko samo! Specialisté provádějí hnojení pomocí speciálního zařízení.

Jak probíhá procedura ICSI?

Provádí se ve 4 hlavních fázích:

• Při punkci se oocyty odebírají do speciálních misek s kultivačním médiem. Tyto kalíšky jsou následně umístěny do inkubátoru, kde jsou udržovány optimální (simulující vnitřní prostředí ženského těla) stabilní podmínky. Tam vajíčka „odpočívají“ několik hodin až do oplodnění.
• Příprava spermií k oplodnění se nejčastěji provádí technologií centrifugace v hustotním gradientu. Ejakulát se přelije přes suspenzi koloidních částic o určité hustotě a odstředí. Výsledkem je, že nejkvalitnější spermie končí na dně zkumavky ve formě sedimentu, zatímco semenná plazma, leukocyty, epiteliální buňky a nepohyblivá spermie jsou zadrženy v horních vrstvách roztoku.
• Příprava vajec. Oocyty získané při punkci jsou obklopeny velkým množstvím kumulálních buněk, které jsou nezbytné pro jejich vývoj uvnitř folikulů. Před ICSI je kumulus opatrně odstraněn pomocí enzymu hyaluronidázy. Teprve poté může embryolog posoudit zralost vajíčka a provést oplodnění.
• Oplodnění vajíčka se provádí pod mikroskopem pomocí speciálních mikronástrojů. Embryolog „vyšetřuje“ spermie jednu po druhé pod velmi velkým zvětšením (200-400krát), posuzuje jejich pohyblivost a stavbu hlavy, krku a ocasu. Buňka, která je z hlediska těchto vlastností nejslibnější, se znehybní a nasaje do skleněné mikrojehly, poté se touto jehlou propíchne vajíčko, které se přidrží mikropřísavkou, a uvolní se do ní spermie.

Poté se vejce vrátí do inkubátoru a teprve po 16-20 hodinách můžeme pochopit, zda byl postup účinný. Pokud došlo k oplodnění, embrya jsou sledována po dobu 3-6 dnů až do transferu nebo kryokonzervace.

Následující fáze IVF programu jsou standardní. V současné době je nejčastější způsob přenosu embryí pátý den vývoje. Je to dáno tím, že právě v této fázi lze nejpřesněji posoudit potenciál embryí, vybrat k transferu to nejslibnější, a tudíž zvýšit pravděpodobnost otěhotnění. Při transferu je embryo umístěno do měkkého ohebného katétru, který se bezbolestně zavede do dutiny děložní. 10-14 dní po přenosu embrya se doporučuje vyhodnotit hladinu hCG v krevním séru za účelem stanovení těhotenství.

Důležité! Míra rizik při ICSI je stejná jako při standardním IVF bez této manipulace. Procedura neovlivňuje zdraví nenarozeného dítěte a nemá negativní dopad na tělo matky. Ani ti nejzkušenější specialisté však nemohou zaručit, že po intracytoplazmatické injekci dojde k otěhotnění a narodí se zdravé dítě.

Hlavní rizika spojená s mimotělním oplodněním souvisejí s charakteristikou těhotenství. Může se vyvinout mimoděložní těhotenství a vícečetné těhotenství, je možný porod mrtvého dítěte a spontánní potrat.

Důležité! Kromě ICSI existují další asistované technologie. Výběr vhodného provádí výhradně lékař. Pouze on má potřebné znalosti a dovednosti.

Výhody postupu v MEDSI

• Osobní lékař. Provádí pár celým procesem mimotělního oplodnění a činí hlavní rozhodnutí.
• Vlastní laboratoř. Provádí všechny potřebné manipulace související s ICSI a IVF obecně. Naše laboratoř poskytuje optimální podmínky pro úspěšnou práci s biomateriálem (vícestupňové čištění vzduchu, udržování tlaku, teploty a vlhkosti v prostorách, neustálé automatizované sledování podmínek pěstování)
• FertiProof, unikátní systém pro sledování shody vzorků biomateriálů v Rusku. Díky němu jsou eliminována veškerá rizika záměny biomateriálu pacienta za cizí.
• Soulad s mezinárodními protokoly. Všechny postupy jsou prováděny v souladu se schválenými normami a standardy.
• Sledování stavu ženy během a po oplodnění. Můžete se spolehnout na neustálou pomoc zkušených specialistů.

Zdroje:

• Makarova N. P., Kalinina E. A. Kritéria pro hodnocení kvality oocytů v cyklech ICSI: pohled klinického embryologa // Gynekologie. – 2012. – V. 14. – Č. 3. – S. 24-8
• Vityazyeva I. I., Bogolyubov S. V., Dedov I. I. Moderní technologie v léčbě azoospermie metodou mikrodisekce TESE v programu IVF-ICSI. Přehled literatury. Část I //Problematika endokrinologie. – 2012. – V. 58. – Č. 5. – S. 66-74
• Glinkina Zh. I. Lékařské a genetické aspekty vyšetření manželských párů s neplodností v programu IVF a PE, ICSI: diss. – Středisko lékařského a genetického výzkumu Státní instituce Ruské akademie lékařských věd, 2005
• Glinkina Zh. I. Komplexní genetické vyšetření mužů: programy ICSI // Gynekologie. – 2006. – V. 8. – Č. 4. – S. 60-3

ICSI je jednou z metod léčby neplodnosti, která se používá v případě, že je spermií málo nebo jsou nepohyblivé a nemohou se samy dostat k vajíčku.

ICSI doplňuje standardní protokol IVF. Embryolog spermie předem vybere, připraví a pomocí velmi tenké jehly vstříkne do oocytu. Je to bezpečné: jehla nepoškozuje reprodukční buňky a nenarušuje oplodnění. Metoda se používá po celém světě a zvyšuje šance na otěhotnění i v situacích, kdy klasické mimotělní oplodnění není příliš účinné. Prozradíme vám podrobněji, komu se doporučuje podstoupit ICSI a odhalíme všechny záludnosti zákroku.

Jaký je rozdíl mezi IVF a ICSI

IVF a ICSI jsou dva různé postupy.

In vitro fertilizace je celý cyklus umělého oplodnění. Zahrnuje stimulaci ovulace, punkci folikulů, oplodnění předem připravenými spermiemi, kultivaci a přenos embryí.

Intracytoplazmatická injekce spermie je jednou z fází IVF. Bez IVF neexistuje ICSI.

Při ICSI vybere embryolog pouze jednu z nejlepších spermií a pomocí speciálního přístroje ji vstříkne pod skořápku vajíčka. Všechny ostatní fáze probíhají úplně stejně jako u běžného oplodnění in vitro.

ICSI není vždy prováděna v programu IVF. Existují přísné indikace pro intraplazmatickou injekci, zejména mužská neplodnost. Níže vám o nich řekneme více.

Jaké jsou výhody ICSI?

V běžném programu je nemožné řídit proces hnojení. Embryolog umístí oocyty do speciální nádoby a přidá do ní spermie. Samčí buňky se vrhnou k samici, obklopí ji, rozpustí membránu a jedna z nejrychlejších pronikne pod ni. Je to on, kdo oplodní vajíčko, a zbytek zemře. Není možné předvídat, která spermie se dostane k vajíčku, rozhoduje náhoda. Všechno je stejné jako u normálního početí, jen ne v těle ženy, ale v laboratoři.

V programu IVF ICSI lze oplodnění zcela kontrolovat. Lékař vybere přesně spermie, které jsou vhodné pro úspěšné početí dítěte. Proto se používá v místech, kde se konvenční IVF může ukázat jako neúčinné.

• eliminuje oplodnění vadnými spermiemi;
• umožňuje použít sperma, i když je nekvalitní;
• eliminuje možnost infekce ženy složkami spermatu;
• zvyšuje šance na úspěch.

Kdo je indikován pro ICSI?

• partner má špatnou kvalitu spermií: je málo pohlavních buněk, jejich koncentrace je snížená nebo existují strukturální abnormality;
• partner má infekci HIV a je nutné zabránit přenosu viru na embryo;
• partner má genetické choroby a nesmí je přenést na dítě;
• po punkci bylo získáno méně než 5 oocytů;
• Předchozí pokus byl neúspěšný.

Ve všech těchto případech zvyšuje intracytoplazmatická injekce šance na otěhotnění.

Trénink

ICSI probíhá v několika fázích. Mnoho z nich postupuje úplně stejně jako při běžném mimotělním oplodnění. Váš lékař vám podrobně vysvětlí každou fázi.

Příprava na ICSI je stejná jako na běžné IVF. Žena se musí poradit s reprodukčním specialistou a podstoupit vyšetření: provést testy krve a moči, stěry na infekce, udělat ultrazvuk pánevních orgánů a posoudit průchodnost vejcovodů. Je bezpodmínečně nutné navštívit terapeuta a nechat si udělat EKG. Pokud máte chronické onemocnění, poraďte se s jinými odborníky.

Muž bude také muset před zákrokem podstoupit vyšetření: konzultovat androloga, udělat spermiogram a testy na infekci. To vše je nezbytné pro posouzení celkového zdravotního stavu páru, identifikaci indikací pro IVF a vyloučení kontraindikací.

Po vyšetření se dvojice zapíše do protokolu.

Program vyžaduje, aby ve vaječnících dozrálo několik oocytů najednou – nejlépe 5-10 kusů. Za tímto účelem lékař předepisuje ženě hormonální léky. Někdy se IVF provádí v přirozeném cyklu – bez hormonální stimulace.

Lékař sleduje vývoj oocytů pomocí ultrazvuku. Jakmile vajíčka dosáhnou velikosti 18 mm, předepíše se další hormonální lék k dokončení dozrávání a přechodu do další fáze.

Když jsou vajíčka plně zralá, lékař provede transvaginální punkci. Jedná se o jednoduchý, minimálně invazivní zákrok, který trvá asi 10-15 minut. Provádí se v intravenózní anestezii: pacient spí a nic necítí. Punkce se provádí tenkou jehlou, nezanechává jizvy a tkáně se rychle hojí.

Během punkce lékař provede malý vpich do poševní stěny a pomocí speciálního nástroje shromažďuje tekutinu spolu se zralými vajíčky. Výsledné buňky jsou odeslány do laboratoře. Po punkci lékař pacientku nějakou dobu pozoruje a poté ji pošle domů.

Spermie se zpravidla získávají v den punkce. Muž přichází na kliniku a pomocí masturbace odebírá spermie ve speciální místnosti. Ale to není vždy vhodné, takže můžete použít zmrazený materiál. Muž daruje spermie předem, lékař je zmrazí a v den punkce je rozmrazí a použije k oplodnění oocytů.

Někdy není možné spermie odebrat přirozeně. Poté muž podstoupí minimálně invazivní operaci a získá pohlavní buňky přímo z varlete. Zákrok se provádí v lokální anestezii nebo celkové anestezii v závislosti na způsobu získání zárodečných buněk.

Fáze procedury ICSI

Embryolog vyhodnotí kvalitu získaných mužských zárodečných buněk a poté zahájí proceduru:

• čistí a zpracovává spermie;
• pod mikroskopem s velkým zvětšením vybere jednu spermii – morfologicky správnou a pohyblivou, s nejlepšími vlastnostmi;
• imobilizuje spermie a umístí je do mikroskopické jehly;
• propíchne skořápku vajíčka jehlou a vstříkne dovnitř spermii.

Embryolog poté umístí oplodněné vajíčko do inkubátoru, kde bude embryo pečlivě sledováno pomocí moderního vybavení. Tam bude zrát, dokud se nepřenese do dělohy.

Co se stane po ICSI

Kultura embryí. Po oplodnění jsou embrya umístěna do speciálního inkubátoru, kde proběhnou první fáze vývoje – až do stádia blastocysty. Tento proces trvá asi 5 dní. Vypěstovaná embrya jsou poté zkontrolována a připravena k přenosu do dělohy.

Přenos embrya. Embryolog vybere jedno kvalitní embryo a zbytek zamrazí. Mohou být použity v následujících programech.

Transfer embrya se provádí v gynekologické ordinaci. Jedná se o jednoduchou manipulaci: provádí se bezbolestně a v pohodlných podmínkách. Pomocí tenkého katétru pod ultrazvukovou kontrolou lékař posune embryo přes děložní hrdlo do dutiny děložní. Embryo si najde vhodné místo na sliznici a implantuje se do ní. Tento proces se nazývá implantace.

Sledování nástupu těhotenství. Jakmile je embryo v děloze, nezbývá než čekat, než dojde k otěhotnění. Můžete to zjistit pomocí krevního testu na hCG. Lékař jej předepíše 14 dní po embryotransferu. Pokud je výsledek pozitivní, budete muset udělat ultrazvuk za další 2-3 týdny, abyste se ujistili, že se embryo vyvíjí a je s ním vše v pořádku.

ICSI je nadějí pro ty páry, pro které běžný program není vhodný. A hlavní roli zde hraje jednání embryologa. To je přesně ten případ, kdy úspěch závisí na přesnosti provedených postupů. Proto je důležité vybrat si kompetentní odborníky, kteří mají rozsáhlé zkušenosti a kompetence a pomohou dosáhnout dlouho očekávaného těhotenství.